Главная страницаСтатьи сотрудников
Сегодня:

РОЛЬ ГЕНОТИПА ВИРУСА ПАПИЛЛОМЫ ЧЕЛОВЕКА В РАЗВИТИИ ЭПИТЕЛИАЛЬНЫХ ДИСПЛАЗИЙ И ПРЕИНВАЗИВНОГО РАКА ШЕЙКИ МАТКИ У ЖЕНЩИН В РЕСПУБЛИКЕ БЕЛАРУСЬ


Опубликовано в журнале «Акушерство и гинекология» - 2008. - №2. – С. 44-46.   (Скачать PDF версию статьи - 103 Кб.)

Г.И. Вергейчик

Учреждение Образования «Гомельский государственный медицинский университет»


Цель исследования: выявить доминирующие ВПЧ генотипы и определить их ассоциацию с эпителиальными дисплазиями и преинвазивным раком шейки матки у женщин в Республике Беларусь.

Методология: проспективное исследование

Учреждение: Учреждение Образования «Гомельский государственный медицинский университет»

Материалы исследования: 97 пациенток с патологией шейки матки: койлоцитозом многослойного плоского эпителия, эпителиальными дисплазиями I-III степени тяжести (CIN I-III), преинвазивным раком (Ca in situ), микроинвазивным раком (Ia1 стадия по FIGO) в возрасте от 18 до 55 лет.

Методы исследования: простая и расширенная кольпоскопия, морфологическое исследование материала, ПЦР-диагностика.

Результаты исследования: у 86 (88,6%) обследованных пациенток было выявлено ДНК папилломавирусов высокого риска, 11 (11,4%) женщин оказались ВПЧ-ВР негативны. В 31 (40,8%) случае эпителиальные дисплазии и преинвазивный рак шейки матки ассоциирован с ВПЧ-16 типа, как в виде моноинфекции, так и в сочетании с другими типами ВПЧ-ВР. Второе и третье место по частоте встречаемости занимают ВПЧ-33 и ВПЧ-31 типов, составляя 22,4% и 14,5% соответственно. Во многих странах занимающий второе место по частоте встречаемости при предраковой патологии и раке шейки матки ВПЧ-18 типа в нашем исследовании оказался на восьмом месте и составил 6,6%.

Заключение: проведённое исследование продемонстрировало различия в превалентности ВПЧ генотипов в развитии дисплазий и рака эпителия шейки матки в Республике Беларусь по сравнению с Северной Америкой и странами Западной Европы. Эта информация даёт основания продолжать исследования в этом направлении, чтобы при популяционном анализе можно было получить достоверные значения доминирующих ВПЧ-генотипов в развитии эпителиальных дисплазий и рака шейки матки и разработать оптимально адоптированную панель вирусов для создания профилактической вакцины, удовлетворяющей особенностям эпидемиологии генитальной ВПЧ-инфекции в Республике Беларусь.

В мире ежегодно регистрируется около 500 000 новых случаев рака шейки матки, будучи в большинстве случаев предотвращаемым, он является причиной смерти 250 000 женщин в год [2]. Учитывая территориальную принадлежность Республики Беларусь к Европе, необходимо остановиться на различиях в заболеваемости раком шейки матки в европейских странах. В странах Евросоюза заболеваемость в среднем составляет 7-8 случаев на 100 000 населения, в то время как в странах Восточной Европы заболеваемость достигает 30-35 случаев на 100 000 населения (в Сербии и Румынии) [2]. В Республике Беларусь заболеваемость раком шейки матки в 1990 году была 14,7 на 100 000, в то время как в 2005 году заболеваемость составила 17,4 на 100 000 населения, изменилась возрастная структура заболевших раком шейки матки, смещение произошло в сторону пациенток репродуктивного возраста [1]. Изменение возрастной структуры заболевших связано с широким распространением основного этиологического фактора рака шейки матки - вируса папилломы человека высокого онкогенного риска (ВПЧ-ВР), что обусловлено изменением сексуальных стереотипов поведения женщин.

Поскольку ВПЧ-инфекция широко распространена среди здоровых женщин, очевидно, что дополнительные эпидемиологические, иммунологические и генетические факторы влияют на процессы канцерогенеза в эпителии шейки матки и указывают на то, что ВПЧ высокого риска являются необходимым, но не единственным фактором развития рака шейки матки. Пик генитальной ВПЧ-инфекции приходится на возраст 20–25 лет и снижается после 30 лет, когда существенно возрастает частота дисплазий и рака шейки матки, пик которого приходится на 45-55 лет. Обычно ВПЧ-инфекция носит временный характер и при первичной инфекции самоизлечение может наступить через 6–8 месяцев [7]. Персистентная инфекция с длительной, активной экспрессией вирусных онкобелков E6/E7 является необходимым условием возникновения рака шейки матки. Можно полагать, что роль вирусной инфекции сводится к запуску многостадийного процесса трансформации, который в значительной степени контролируется клеточными факторами.

Известно, что ВПЧ-16, 18 наиболее широко распространённы в мире и именно этим типам вируса принадлежит основное значение в развитии рака шейки матки в США и странах Западной Европы, однако превалирующие типы ВПЧ-ВР различаются географически. Так исследования, проведённые в Шотландии и Австралии, продемонстрировали, что при эпителиальных дисплазиях и раке шейки матки ВПЧ-16 генотип выявлен в 47% и в 52,9% случаев, а ВПЧ-18 – в 29% и 18,3% случаев соответственно [5, 6]. В то время как исследование в большой популяции японских женщин выявило наиболее высокую частоту встречаемости ВПЧ-52, 16 и 58 типов при патологии шейки матки [3]. У мексиканских женщин, где заболеваемость раком шейки матки – одна из самых высоких в мире, наиболее часто при эпителиальных дисплазиях и раке шейки матки выявлена ДНК ВПЧ-16 типа (71,6%), и ВПЧ-58 типа (18,6%), а частота встречаемости ВПЧ-18 типа составляет всего 4,6% [4]. Актуальным является использование вакцины для профилактики рака шейки матки. Для создания вакцины необходимо сформировать оптимальную панель ВПЧ-генотипов, учитывая превалентность и роль ВПЧ-генотипа в развитии дисплазии и рака шейки матки.

Целью исследования явилось – выявить доминирующие ВПЧ генотипы и определить их ассоциацию с эпителиальными дисплазиями и преинвазивным раком шейки матки у женщин в Республике Беларусь.

Материал и методы исследования

С 2005 по 2006 год обследовано 97 пациенток от 18 до 55 лет (средний возраст 29,3 года). У всех женщин диагноз был верифицирован гистологически. У 21 больной диагностировали койлоцитоз многослойного плоского эпителия, у 24 женщин выявлена дисплазия лёгкой степени, у 22 – дисплазия умеренной степени, у 19 – дисплазия тяжёлой степени, у 10 – TisNoMo 0 стадия, у 1 пациентки – рак шейки матки T1a1NoM0 Ia1 стадия. Были использованы следующие методы исследования: расширенная кольпоскопия, цитологический и гистологический методы исследования. Для обнаружения папилломавирусов высокого онкогенного риска (ВПЧ-ВР) выполняли полимеразную цепную реакцию (ПЦР). Был использован набор на определение суммарного ДНК ВПЧ-ВР и комплекс «АмплиСенс-50-F ВПЧ ВКР-скрин» для выявления 14 вирусов высокого онкогенного риска. Метод основан на одновременной амплификации (мультиплекс-ПЦР) участков ДНК Е1-Е2 генов трёх групп ВПЧ и участка ДНК β-глобинового гена, используемого в качестве эндогенного внутреннего контроля. ПЦР-анализ на наличие ДНК 14 типов ВПЧ проводиться в одной пробирке. Все амплифицируемые пробирки имеют сходную длину.

Математическую обработку полученных результатов проводили с помощью программы Statistica 6,0, Microsoft Excel.

Результаты исследования и обсуждение

Из обследованных 97 больных с различной патологией шейки матки, у 86 (88,6%) пациенток была выявлена ДНК папилломавирусов высокого риска, 11 (11,4%) женщин - ВПЧ-ВР негативны. Двадцати (20,6%) больным была проведена ПЦР на определение только суммарной ДНК ВПЧ-ВР и получен позитивный тест. Остальным 76 (78,4%) больным провели ВПЧ-генотипирование. Из них, у 65 (85,5%) больных определён генотип ВПЧ-ВР, у 11 (11,4%) больных ВПЧ-ВР определён не был.

Распределение папилломавирусов в виде одного или нескольких генотипов вирусов высокого онкогенного риска при эпителиальных дисплазиях 1-3 степени тяжести, преинвазивном, микроинвазивном раке эпителия шейки матки и койлоцитозе многослойного плоского эпителия (эписомальной форме персистенции) представлены в табл. 1.


Таблица 1 - Распределение генотипов ВПЧ-ВР у пациенток с патологией шейки матки

Тип ВПЧ /число случаев, % Число больных с эпителиальной дисплазией и раком шейки матки, у которых выявлена ДНК ВПЧ-ВР
CIN 121 случай CIN 220 случаев CIN 316 случаев Ca in situ 9 случаев Рак шейки матки T1a1N0M0 Iа1 стадия 1 случай Койлоцитоз плоского эпителия 11 случаев
ВПЧ-16 в 31 случае, 40,8% 7 9 9 1 1 4
ВПЧ-18 в 5 случаях, 6,6% 2 1 1 1 Не выявлен Не выявлен
ВПЧ-31 в 11случаях, 14,5% 4 3 3 1 Не выявлен Не выявлен
ВПЧ - 33 в 17 случаях, 22,4% 7 4 1 2 Не выявлен 3
ВПЧ - 35 в 9 случаях, 11,8% 2 4 2 1 Не выявлен Не выявлен
ВПЧ - 39 в 1 случае, 1,3% Не выявлен 1 Не выявлен Не выявлен Не выявлен Не выявлен
ВПЧ - 45 в 6 случаях, 7,8% 2 2 Не выявлен 1 Не выявлен 1
ВПЧ - 52 в 6 случаях, 7,9% 2 2 1 Не выявлен Не выявлен 1
ВПЧ - 56 в 8 случаях, 10,5% 1 2 3 2 Не выявлен Не выявлен
ВПЧ - 58 в 4 случаях, 5,3% 3 Не выявлен 1 Не выявлен Не выявлен Не выявлен
ВПЧ - 59 в 2 случаях, 2,6% Не выявлен 1 Не выявлен Не выявлен Не выявлен 1
ВПЧ - 66 в 2 случаях, 2,6% Не выявлен 1 Не выявлен Не выявлен Не выявлен Не выявлен

Необходимо отметить, что при дисплазии лёгкой степени у 4 (19,1%) пациенток не выявлено ДНК ВПЧ-ВР, в то время как у 17 (80,9%) определили вирусы высокого онкогенного риска. В 7 (41%) случаях определен 1 тип ВПЧ-ВР, а в 10 (59%) случаях выявлена ассоциация 2 и более типов вирусов высокого риска, из которых, у 6 (60%) пациенток определено сочетание ВПЧ-16, 18 с другими типами ВПЧ. При дисплазии умеренной степени отрицательный ПЦР тест у 1 (5%) больной, у 19 (95%) выявлены ДНК ВПЧ-ВР. В 12 случаях (63,2%) выявлен один тип вируса, в 7 (36,8%) случаев ассоциация нескольких типов папилломавирусов, из которых в 4 (51,1%) случаях - сочетание с ВПЧ-16, 18. При дисплазии тяжёлой степени ВПЧ-ВР негативный тест у 1 (7%) пациентки, у 13 (93%) в эпителии шейки матки определены папилломавирусы высокого онкогенного риска. В 6 (46%) случаях – моноинфекция, у 7 (54%) больных выявлена ассоциация 2 и более типов ВПЧ-ВР. Из них, у 6 (85,7%) пациенток - сочетание с ВПЧ-16 типа. У 3 (33%) женщин с преинвазивным раком шейки матки не выявлена ДНК папилломавирусов, у 6 (67%) пациенток были генотипированы папилломавирусы. В 4 (67%) случаях определён один тип ВПЧ-ВР, в 2 (33%) случаях ассоциация нескольких типов ВПЧ-ВР, из них, в 1 случае с ВПЧ-16. Нами была обследована 1 женщина с микроинвазивным раком шейки матки (T1a1N0M0 Ia1 стадия) у которой выявлена ДНК ВПЧ-16 типа. У 2 (18,2%) пациенток с эписомальной формой персистенции ВПЧ-инфекции ПЦР тест отрицательный, у 9 (81,8%) женщин выявлена ДНК ВПЧ-ВР. Восемь (89%) женщин инфицированы одним типом ВПЧ-ВР, и лишь у 1 (11%) больной определили сочетание двух и более типов папилломавирусов высокого онкогенного риска.

При койлоцитозе многослойного плоского эпителия, который является маркёром эписомальной формы персистенции ВПЧ-инфекции, превалирует инфицирование одним типом вируса, в 89% случаев. Вероятно, это позволяет иммунной системе длительное время сохранять баланс между вирусом и организмом пациентки и препятствует переходу ВПЧ в интегрированную форму персистенции, которая сопровождается развитием эпителиальных дисплазий.

В результате проведённого исследования следует отметить, что наиболее часто, в 40,8% случаев, эпителиальные дисплазии и преинвазивный рак шейки матки ассоциированы с ВПЧ-16 типа, как в виде моноинфекции, так и в сочетании с другими типами ВПЧ-ВР.

Второе и третье место по частоте встречаемости занимают ВПЧ-33 и ВПЧ-31 типов, составляя 22,4% и 14,5% соответственно. Во многих странах занимающий второе место по частоте встречаемости при предраковой патологии и раке шейки матки ВПЧ-18 типа в нашем исследовании оказался на восьмом месте и составил 6,6%.

В заключение необходимо обратить внимание на то, что проведённое инициативное исследование продемонстрировало различия в превалентности ВПЧ генотипов в развитии дисплазий и рака эпителия шейки матки в Республике Беларусь по сравнению с Северной Америкой и странами Западной Европы [5, 6]. Эта информация даёт основания продолжать исследования в этом направлении, чтобы при популяционном анализе можно было получить достоверные значения доминирующих ВПЧ-генотипов в развитии эпителиальных дисплазий и рака шейки матки и разработать оптимально адоптированную панель вирусов для создания профилактической вакцины, удовлетворяющей особенностям эпидемиологии генитальной ВПЧ-инфекции в Республике Беларусь.


ЛИТЕРАТУРА

1. Злокачественные новообразования в Беларуси 1996-2005 / С.М. Поляков, Л.Ф. Левин, Н.Г. Шебеко; под ред. А.А. Граковича, И.В. Залуцкого. – Минск: БелЦМТ, 2006. – 194 с.

2. GLOBOCAN 2002: Cancer incidence, Mortality and Prevalence Worldwide. IARC CancerBase No. 5, version 2.0. IARC Press, 2004.

3. Inoue M., Sakaguchi J., Sasagawa T., Tango M. // International Journal of Gynecological Cancer. – 2006. – Vol. 16, I. 3. – P. 1007-1013.

4. Pina-Sanchez P., Hernandez-Hernandez D.M., Lopez-Romero R. et al. // International Journal of Gynecological Cancer. – 2006. – Vol. 16, I. 3. – P. 1041-1047.

5. Stevens M.P., Tabrizi S.N., Quinn M.A., Garland S.M. // International Journal of Gynecological Cancer. – 2006. – Vol. 16, I. 3. – P. 1017-1024.

6. Tawfik El-Mansi M., Cuschieri K.S., Morris R.G., Williams A.R. // International Journal of Gynecological Cancer. – 2006. – Vol. 16, I. 3. – P. 1025-1031.

7. Tjiong M., Out T., Van Der Vange N. et al. // International Journal of Gynecological Cancer. – 2001. – Vol. 11, I. 1. – P. 9-17.


Страница обновлена: 08.04.2012

© ООО “Цитоген”, Республика Беларусь, г. Гомель, ул. Б. Хмельницкого, 67.
Медицинские услуги.
Наши услуги | О сотрудниках | Статьи сотрудников | Справочная информация | Задать вопрос | Схема проезда